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層析櫃是一種高分離率、高靈敏度和高選擇性的分離方法
更新時間:2024-02-02 點擊次數:4304
  層析櫃是一種用於分離和純化樣品的設備,它采用了層析技術,這是一種具有高分離率、高靈敏度和高選擇性的分離方法。
 
  使用原理:
 
  生物分子間存在很多特異性的相互作用,它們之間都能夠專一而可逆的結合,這種結合力就稱為親和力。親和層析就是通過將具有親和力的兩個分子中一個固定在不溶性基質上,利用分子間親和力的特異性和可逆性,對另一個分子進行分離純化。被固定在基質上的分子稱為配體,配體和基質是共價結合的,構成親和層析的固定相,稱為親和吸附劑。親和層析時首先選擇與待分離的生物大分子有親和力物質作為配體,並將配體共價結合在適當的不溶性基質上。將製備的親和吸附劑裝柱平衡,當樣品溶液通過親和層析柱的時候,待分離的生物分子就與配體發生特異性的結合,從而留在固定相上;而其它雜質不能與配體結合,仍在流動相中,並隨洗脫液流出,這樣層析柱中就隻有待分離的生物分子。通過適當的洗脫液將其從配體上洗脫下來,就得到了純化的待分離物質。
 
  設備結構:
 
  層析櫃通常由以下幾個部分組成:外殼、工作區域、控製係統等。外殼通常由金屬或耐酸堿塑料製成,主要目的是保護工作區域,防止外界汙染,並提供便於清洗和消毒的表麵。工作區域通常由內襯不鏽鋼的工作麵板、前玻璃門、風道係統和高效過濾器組成,風道係統和高效過濾器可過濾空氣,並將潔淨空氣輸送至工作區域,防止外部雜質進入。控製係統則由電子和機械部件組成,包括紫外線照射器、通風機和風量計等,可保證工作區域的負壓狀態,確保汙染物向層析櫃外部排放。
 
  操作步驟:
 
  層析櫃的使用操作包括以下幾個步驟:樣品的準備和處理、層析柱的安裝和平衡、上樣和洗脫、收集和檢測。在操作過程中,需要注意避免樣品汙染和交叉汙染,同時要控製好流速和溫度等參數,保證分離效果和實驗結果的準確性。
 
  注意事項:
 
  層析櫃在使用過程中需要注意以下幾點:首先,要嚴格按照操作規程進行操作,避免人為失誤導致的實驗失敗;其次,要保持設備的清潔和衛生,避免樣品汙染和交叉汙染;第三,要定期對設備進行維護和保養,保證其正常運轉和使用壽命;最後,要注意安全問題,如避免超壓運行、避免使用未經批準的化學品等。

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